背景

木香为菊科植物木香的干燥根，含大量油脂类成分。这些成分对GC/MS/MS色谱柱污染较为严重，易造成目标保留时间漂移和丢峰，常规的固相萃取法一、固相萃取法二、固相萃取法三都不能很好的净化。因此纳谱分析根据木香油脂成分特点，在优化填料的同时优化了木香的提取方式。优化后的方案可以有效地减轻木香GC/MS/MS分析中存在的问题，降低了样品中油脂成分对色谱柱的污染和基质效应。今天，我们来看看木香项目的前处理效果吧。

适用范围

本方法参考中国药典2020版2341第五法中的快速样品处理法（QuEChERS）法。

实验步骤

1.对照品溶液的制备

1.1 混合对照品配制

精密量取禁用农药混合1 mL，置20 mL量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，备用。

1.2 气相色谱-串联质谱法分析用内标溶液的制å备

取磷酸三苯酯对照品适量，精密称定，加乙腈溶解并制成每1 mL含1.0 mg的溶液，即得。精密量取适量，加乙腈制成每1 mL含0.1 μg的溶液。

1.3 空白基质溶液的制备

取木香空白基质样品，同供试品溶液的制备方法处理制成空白基质溶液。

1.4 基质混合对照溶液的制备

分别精密量取空白基质溶液1.0 mL(6份），置氮吹仪上，40 °C 水浴浓缩至约0.6 mL，分别加入混合对照品溶液10 μL、20 μL、50 μL、100 μL、150 μL、200 μL，加乙腈稀释至1 mL，涡旋混匀，即得。

2.供试品溶液的制备

2.1.1 GC/MS/MS样品提取（QuEChERS法）：

取木香粉末（过3号筛）3 g，精密称定，置50 mL聚苯乙烯具塞离心管中，加入水15 mL，涡旋使药粉充分浸润，放置30 min，精密加入乙腈15 mL，涡旋使混匀，置振荡器上剧烈振荡（500次/分）5 min，加入QS-002盐包，立即摇散，再置振荡器上剧烈振荡（500次/分）3 min，于冰浴中冷却10分钟，离心（4000转/分）5分钟，待净化。

2.1.2净化

SPE净化管：Q-15A06 SelectCore QuEChERS净化管15 mL, Pesticide Residue A06（含色素挥发油中药农残Q法）

净化：取上述提取液上清液9 mL置Q-15A06净化管中涡旋使充分混匀，置振荡器上剧烈振荡（500次/分）5分钟使净化完全，离心（4000转/分）5分钟，即得。

2.1.3分析

GC-MS/MS测定：精密吸取上清液1 mL，置氮吹仪上于35 ℃水浴浓缩至约0.4 mL，加入混合对照品液再加乙腈稀释至1.0 mL，涡旋混匀，再加入0.3 mL磷酸三苯酯溶液，混匀，过0.22 μm滤头，上机分析。

2.2.1 LC/MS/MS样品提取（QuEChERS法）：

取木香粉末（过3号筛）3 g，精密称定，置50 mL聚苯乙烯具塞离心管中，加入1%冰醋酸溶液15 mL，涡旋使药粉充分浸润，放置30 min，精密加入乙腈15 mL，涡旋使混匀，置振荡器上剧烈振荡（500次/分）5分钟，加入QS-002盐包，立即摇散，再置振荡器上剧烈振荡（500次/分）3分钟，于冰浴中冷却10分钟，离心（4000转/分）5分钟，待净化。

2.2.2净化

Q法净化管：Q-15A06 SelectCore QuEChERS净化管15 mL, Pesticide Residue A06（含色素挥发油中药农残Q法）

净化：取上述提取液上清液9 mL置Q-15A06净化管中涡旋使充分混匀，置振荡器上剧烈振荡（500次/分）5分钟使净化完全，离心（4000转/分）5分钟，即得。

2.2.3分析

LC-MS/MS测定：精密吸取上清液5 mL，置氮吹仪上于35 ℃水浴浓缩至约0.4 mL，加入混合对照品液再加乙腈稀释至1.0 mL，涡旋混匀，再加入0.3 mL水，混匀，过0.22 μm滤头，上机分析。

3.气相色谱-串联质谱法（岛津 GC-MS -TQ8040 NX）

色谱条件

色谱柱：NanoChrom BP-50+MS, 30 m×0.25 mm×0.25 μm;

进样口温度：250 ℃；

升温程序：初始温度为60 ℃，保持1 min；以10 ℃/min升温至160 ℃；再以2 ℃/min升温至230 ℃，最后以15 ℃/min升温至300 ℃，保持6 min；

载气：高纯氦气（纯度>99.999%）；

进样方式：不分流进样；

恒压模式：146 kPa；

进样量：1μL。

质谱条件

电离方式：电子轰击电离源（EI）；

电离能量：70 Ev；

接口温度：250 ℃；

离子源温度：250 ℃；

监测方式：多反应监测模式（MRM）；

溶剂延迟：10 min。

GC/MS/MS监测目标物 注意事项：样品浓度为0.2 g/mL；前加标建议加300 μL混合对照品提取，浓度为标准曲线第二个浓度点浓度（20 μL/mL）。由于样品浓度较低，建议分析前重新调谐检查灯丝能量后再进行分析，仪器灵敏度过低可能导致对硫磷丢峰或分析结果不准确。

氟虫腈和氟虫腈亚砜 保留时间往后漂移1.8 min左右（参考）

4   高效液相色谱-串联质谱法（岛津 LC-MS 8045）

色谱条件

色谱柱：ChromCore C18-MS Pesticides, 2.6 μm,2.1×100 mm
流动相：

A：0.1%甲酸水溶液（含有5 mmol/L甲酸铵）

B：乙腈-0.1%甲酸水溶液（含有5 mmol/L甲酸铵）=95:5

流速: 0.3 mL/min

柱温: 40 ℃

进样量: 2 µL

梯度：

质谱条件

离子源:电喷雾离子源（Electrospray ionization，ESI）正离子扫描

监测方式：多反应监测（Multiple Reaction Monitoring，MRM）

离子源接口电压：4.5 kV

雾化气：氮气3.0 L/min

加热气：干燥空气10.0 L/min

DL温度：250 ℃

加热模块温度：400 ℃

接口温度：300 ℃

干燥气：N₂ 10 L/min

LC/MS/MS监测目标物注意事项：地虫硫磷、治螟磷 参考GC/MS/MS结果；

挥发油基质样品自动进样器托盘温度不宜过低，否则个别样品会出现分层，导致分析结果不准确，建议20 ℃为宜。

表1 木香中33种农药残留的测定添加回收结果（%）

5.处理后溶液的颜色比对

6 实验讨论

通过以上实验对比数据可以看出，上述方案搭配SelectCore QuEChERS Q-15A06净化管净化后的木香样品溶液颜色较浅，且各化合物出峰较为良好，目标物保留时间漂移也得到了有效减弱，减少了污染GC/MS/MS柱前端的风险。SelectCore QuEChERS Q-15A06净化管针对木香中油脂类成分去除效果良好，联合上述解决办法有效地提高了实验效率，也为木香的农药残留实验数据的稳定性和可靠性提供了良好的帮助。