1.1 乙醇氨水溶液：量取无水乙醇700 mL，加入4 mL氨水，用水稀释并定容至1 L，混匀。

1.2 5%甲醇水溶液：移取甲醇5 mL，用水稀释并定容至100 mL，混匀。

1.3 2%氨水甲醇溶液：移取2 mL氨水，用甲醇稀释至100 mL。

1.4 乙酸铵溶液（20 mmol/L）：称取1.54 g乙酸铵，加水溶解并稀释至1000 mL。

1.5 乙酸铵缓冲溶液，pH=9.0：乙酸铵溶液（20 mmol/L）加氨水调pH至9.0。

1.6 2%甲酸水溶液：移取甲酸2 mL，用水稀释至100 mL。

SelectCore WAX 150mg/6mL固相萃取柱：

3.1 活化：SelectCore WAX 150mg/6mL固相萃取柱，依次用6 mL甲醇和6 mL水活化固相萃取柱，保持柱体湿润；

3.2 上样：活化后立即将步骤2中的待净化液以2 s~3 s 1滴的流速加载到固相萃取柱上；

3.3 淋洗：依次用6 mL 2%甲酸水溶液和6 mL甲醇淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液，真空抽2 min至柱体近干；

3.4 洗脱：用6 mL 2%氨水甲醇溶液洗脱，分两次加入，每次3 mL，流速低于2 s~3 s 1滴，收集洗脱液，于50 ℃氮气浓缩至近干，准确加入2 mL pH为9.0的乙酸铵缓冲溶液溶解，溶液用针筒过滤器，孔径0.45 μm的滤膜过滤，弃去2 滴~5 滴初滤液，取续滤液作为待测液。

Column：ChromCore C18-AC，5μm，4.6×250mm

Mobile Phase：A) 乙酸铵溶液(20 mmol/L)

                         B) 甲醇

Gradient:      t(min)    A%    B%

                      0.01     90     10

                      7.00     87     13

                     17.00    70     30

                     19.00    60     40

                     22.50    55     45

                     30.00     5      95

                     33.00     5      95

                     34.00    90     10

                     42.00    90     10

Flow rate：   1.0 mL/min

Temperature：30 °C

Injection：     10 μL

Detection：    415 nm（柠檬黄、喹啉黄）

                       520 nm（新红、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、酸性红和赤藓红）

                       610 nm（靛蓝、亮蓝）

因亮蓝通常呈现为两个峰，喹啉黄通常呈现为四个峰，所以根据标准溶液出峰情况，以各色谱峰总的峰面积之和计算回收率。