泄漏 在LC系统中发生泄漏的方式有很多种。最常见的与连接有关（例如，管线到阀，或管线到色谱柱）。通常这些泄漏相对较小（即每分钟几微升），可以通过稍微拧紧配件来纠正。但是，要小心，拧得太紧会损坏连接配件或使连接端口变形（如色谱柱的柱头与柱管之间的连接安装和阀口与管线的连接安装）。如果你觉得连接已经很紧密了，那么最好是先考虑换毛细管线，把旧管线扔掉换上新的管线重新开始，看是否能把问题解决了。我总是告诉我的学生，“太松总比太紧好”。再说了更换些毛细管线总比更换高压阀定子要便宜得多了。对连接过度拧紧，毛细管线会变形，还会损坏阀口上的紧固螺纹。泵柱塞和密封件之间也可能发生大的泄漏，任何情况下，在柱塞/密封件区域的泵头中是不允许有液体流出的。如果观察到液体，密封件可能泄漏，应更换。根据我的经验，这个问题并不像20年前的泵那样频繁发生。最后，PEEK管有可能爆裂，即使在低于厂家规定的压力上限下使用也可能发生爆裂，它通常会导致很大的明显泄漏，而连接部和泵密封的泄漏往往没那么明显。

溶剂入口过滤器部分阻塞 LC泵依靠从溶剂瓶到入口止回阀的自由稳定的溶剂流动来正常工作。如果溶剂瓶中管路末端的入口过滤器被颗粒物或细菌生长部分阻塞，则可能会将流动速度减慢到泵“缺乏”溶剂的程度，并且无法以指定的流速将流动相输送到色谱柱，从而导致压力低于预期。如果怀疑这可能是问题所在，快速排查的方法很简单，只需从溶剂管路中取出入口过滤器即可。如果过滤器移除后压力恢复正常，则至少需要清洗过滤器然后重新接入溶剂管路，通常过滤器堵塞这种情况发生时，最好是把溶剂入口过滤器完全更换成新的。

在线过滤器阻塞 在我的实验室中，部分堵塞的过滤器占我们高压问题的95%。一旦过滤器很明显被阻塞，可以尝试对它反冲。但这种解决方案通常是暂时性的。从长远来看，更换过滤器要好得多。

毛细管线阻塞 如果在进样器后有使用在线过滤器（0.2–0.5 μm孔隙率），管线阻塞这种情况并不会经常发生。如果不使用过滤器，则毛细管线的直径越小越容易发生阻塞，而且是最上游端的毛细管线（即最靠近进样器）最有可能发生堵塞。反向冲洗被阻塞的毛细管线，偶尔也可清除掉碎屑积聚物，但最可靠的解决方案还是更换毛细管线。

色谱柱入口端阻塞 在色谱柱前端接入在线过滤器，可以在很大程度上防止这种情况。如果随着时间的推移观察到整个色谱柱的压降增加，反冲可以将阻塞物从柱入口端筛板中冲出。但据我的经验，用这样的方法降低压力通常是短暂的。还有我们必须注意，有些色谱柱制造商在色谱柱入口端使用了孔隙率较大的筛板，反冲会有将部分填料从筛板中冲出泄露的风险。最好的办法还是常规使用在线过滤器或保护柱（也可同时使用）来避免发生色谱柱入口端阻塞。

止回阀（单向阀）故障 典型的往复式双柱塞泵设计依赖于两个止回阀来保持流动相沿色谱柱方向移动。当溶剂从泵头向塔推出时，入口止回阀关闭，使溶剂不能返回溶剂瓶。当溶剂从溶剂瓶中抽出进入泵时，出口止回阀关闭以防止溶剂向后流入泵头。正常工作时，这些止回阀每分钟打开和关闭多次。如果其中一个或两个没有正确打开或关闭，则流向色谱柱的流量将会间隙性发生明显中断，表现出来的则是压力的改变。确定两个止回阀中哪一个出现故障可能很棘手。一种方法是：首先将进口止回阀更换为已知可正常工作的止回阀。如果这不能解决问题，重新安装回原来的进口止回阀，并用已知没问题的阀更换出口止回阀。如果这还不能减少压力波动，那说明问题不出在止回阀上。

泵头中有气泡 即使是止回阀都没问题，泵也可能被气泡连累发生问题。如果空气进到泵头中（例如，在线脱气机无法正常工作或者长时间不使用后，或者泵发生意外的干涸时），则可能导致严重的流量或压力波动。以高流速（柱子断开）清洗泵通常可有效去除气泡并恢复正常运行。如果这不能解决问题，用异丙醇清洗泵头是另一种通常效果很好的方法。

Dwight R. Stoll

美国明尼苏达州Gustavus Adolphus学院的化学终身教授和联合讲席教授

主要研究重点是开发用于靶向和非靶向分析的2D-LC技术。