UPLC：超高效液相色谱（Ultra Performance Liquid Chromatography）

色谱理论认为提高色谱柱的效能（efficiency）就能增加仪器的解析度（resolution），而运用粒径低于2μm的小颗粒无疑是增加效能的好方法。但减小固定相的粒度以增加色谱柱效能一直是色谱仪器科学的瓶颈，因为小颗粒不仅要求系统能承受高于目前极限压力（比如9000psi），需要更小的系统体积（死体积），并且需要能适应可能只有几秒峰宽的高速检测器。

UHPLC：超高效液相色谱 (Ultra-High Performance Liquid Chromatography)

特点是工作压力超过6000 psi或工作温度超过环境温度的应用。由于 UHPLC 应用中使用的硬件通常可以承受 9000 psi或更高的系统压力，因此色谱工作人员可以使用由更高级固相（其颗粒远远小于传统的5 μm直径硅胶）填充的色谱柱。采用颗粒更小的固定相不仅可以实现更高的分辨率，同时还能缩短整体分析时间。

HPLC：高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography）

又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术。

以下几幅图更直观的告诉我们区别何在：

UPLC和HPLC的区别

与传统的高效液相色谱(HPLC)相比，UPLC具有高分离度(ultra resolution)、高速度(ultra speed)、高灵敏度(sensitivity)等优势。在全面提升HPLC的速度、灵敏度和分离度诸品质的同时，保留其原有的实用性及原理。

其最显著的优势是可以缩短分析时间，提高工作效率。

使用UPLC确实能明显缩短分析时间，提高效率（如某有关物质分析方法，使用HPLC运行一针是75分钟，UPLC完全可以在10分钟内搞定），分析效率提高将近7.5倍。

当然了，分析效率提高这么多，其配套设备肯定也不是闹着玩的。UPLC需要小颗粒杂化填料（1.7um）的色谱柱、更高耐压（达15000Psi）、低系统体积的输液单元。

选择UPLC 还是HPLC？

某网友：“由于所在实验室即将添置一台新质谱，质谱已经选好了，但是在液相的选择上很是犹豫，不知是否该买一台UPLC。因为经常是一次分析几百个样品，高速液相的速度会快一些。但是，生物样品的前处理要求也相应提高。而且价格也比较贵。是否需要买UPLC？还是买HPLC？想了解一下大家的使用经验和看法。”

相信这是很多实验室小伙伴会面临的选择，那么到底该从哪些方面来衡量仪器的选型？

有人说，能用HPLC就用，多数情况下，HPLC都能hold住。UPLC肯定是大势所趋。就像很多人所说的一样，UPLC就像是鸦片，用过了就上瘾摆脱不了。这个说法虽然极端，但是话糙理不糙，你觉得有理吗？

网友支招

网友A：

如你所说，使用UPLC肯定能提高你分析的速度，但是不知道目前你选好的质谱是什么型号的？这里存在一个质谱工作站能否兼容你的液相色谱的问题，所以还请考虑仔细。

个人觉得UPLC类的快速液相是大势所趋。

网友B：

个人感觉UPLC不错，最直观的感觉是分析时间大大缩短，这也是UPLC鼓吹的一点。但UPLC对流动相，色谱柱，样品前处理，质谱接口，数据采集系统都提出了更严格的要求，同时带来的液氮、乙腈等耗材的使用量下降，这个是很明显的。至于所用的试剂、耗材等等比HPLC高级多少，我倒没看出来。无非是要求过下0.22μm的膜。个人认为短期内还无法完全替代普通LC。普通液相采用细径色谱柱是目前最成熟和经济的LC-MS方案。

网友C: 

UPLC在分析速度、分离度等方面确实有优势，但对样品的前处理、试剂等提出了更高的要求，样品分析成本也高了。我们知道，影响分析速度快慢的主要步骤是样本的前处理，而仪器分析速度的快慢不是主要因素，现在仪器都是自动进样加24小时开机，测定一个样品多花点时间能有多大影响，很多人那UPLC分析速度快来说事是不合适的。我的行业测定的是食品样品，从我的经验来看，我更喜欢用普通的HPLC。

网友D：

我是做中药成分的，个人觉得还是uplc更好一些。因为是与质谱联用，日常分析中的样品如果成分比较复杂的话，普通液相的色谱条件就不太好找，必然会经常遇到需要加酸、碱或缓冲盐的情况，尤其是缓冲盐的选择受质谱的限制较大。而uplc由于柱效高，分离效果要比普通液相高的多，在很多时候普通液相上加缓冲盐也很难分离的成分，在uplc上什么都不用加就可以分开，而且效果很好。所以觉得uplc在联用时更方便一些。

网友E：

个人认为，如果追求分析速度的话可以选用UPLC，如果考虑的是分析成本的话，还是用HPLC。如果样品量大，分离简单，则可以配UPLC。UPLC配质谱的好处主要在于处理量大，不要把希望寄托在它分离效果好上。一种又快又好又稳定的仪器太难找了。

网友F：

高通量生物分析如果样品量大或食品类样品比较多，建议你不要配UPLC，否则会后悔的。UPLC一般适用于研究性质的实验或样品基质比较干净的实验。

网友G:

个人觉得你要是做生物样品或者医药方面的UPLC还是有优势的，但是你如果是做残留分析，比如农残，兽残什么的就买HPLC就好，UPLC的确是快，但是食品蔬菜什么的基质比较复杂的你就甭想分离的很好，分离效果差很多的。

网友H：

个人意见，如果做生物样品分析，而且每天分析样品量比较大，不建议使用UPLC。UPLC的优点是分离度高，峰形尖锐。但是其填料粒径太小，在高通量生物分析时很容易堵柱子（UPLC柱价格比较贵），使用寿命比HPLC柱少很多。另外其峰形尖锐，与扫描型质谱联用会降低分析物的灵敏度。

网友I：

如果条件允许的话还是买UPLC吧，我们也是样品量很大，如果用hplc可能的跑上一天也不一定打完全部样品，但是用uplc三个小时左右就能打35-40针，还能让仪器休息一下，好好的冲洗系统，如果是用hplc的话估计向我们这么大的样品量，仪器早晚的罢工。再有就是用uplc同时降低了开发方法的时间，提高了工作效率，同时还能省下不少的溶剂，正如waters的广告所说的，在乙腈比较昂贵的时候确实能省不少钱，我们500ml的乙腈能走大约上百针样品（梯度洗脱）。主要是效率高，也提高了灵敏度，峰形好，当然仪器也贵些，好东西，贵点也值得，等你用熟了再用hplc，你就会感觉很不爽，原因我就不说了！就看楼主怎么权衡了！

这么多网友支招，大家是否在面对选择UPLC还是HPLC时，不再犹豫了呢，其实，小编认为，选择哪种仪器，最主要还是要看需求和预算，总的来说，HPLC相比UPLC更加经济，不管是仪器本身的价格，还是使用耗材的价格，而且能够满足多数实验室的一般检测需求。至于UPLC其使用体验的确好过HPLC，关于使用要求来说，其实没那么多问题，只要养成良好的使用维护习惯，也没啥大不了。套用肖博士的一句话：UPLC可以干HPLC的活儿，但是反过来咋办？

（内容整理自药研江湖、北京慧得易）

以上内容转自网络，若有侵权请及时联系我们，我们将尽快删除