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服务与支持

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【应用分享】玉米面粉中呕吐毒素的提取与检测
呕吐毒素是单端孢菌素烯烃中的一种,它通常是由生长在谷类(如小麦、玉米、大麦)上的镰刀菌类产生,呕吐毒素可引起呕吐、厌食、胃肠炎、腹泻、免疫抑制和血液病等症状。呕吐毒素不仅污染小麦、玉米、大麦等谷类作物,也污染粮食制品。使用纳谱分析的SelectCore DON免疫亲和柱可准确、快速的检测呕吐毒素,为食品安全提供保障。



适用范围


本方法参照GB 5009.111-2016 食品安全国家标准 食品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及其乙酰化衍生物的测定 第二法 免疫亲和层析净化高效液相色谱法,适用于谷物及其制品、酒类、酱油、醋、酱及酱制品中呕吐毒素的提取与检测。



实验步骤


一 / 溶液配制

磷酸盐缓冲液:称取8.00 g氯化钠、1.20 g磷酸氢二钠、0.20 g磷酸二氢钾、0.20 g氯化钾,用900 mL水溶解,用盐酸调节pH至7.0,用水定容至1000 mL。

二 / 样品制备

称取5 g(准确到0.1 g)磨碎的试样于50 mL离心管中加入1 g聚乙二醇(相对分子量为6000),加水20 mL,混匀,超声20 min,4000 r/min下离心10 min,取上清液备用。

三 / 固相萃取方法

SelectCore DON 免疫亲和柱 3mL
亲和柱预处理:取出亲和柱,恢复至室温(22-25 °C),亲和柱连接于注射器下,打开下端堵头,将柱内保存液流尽;
上样:准确移取4 mL样品制备中的上清液,注入注射器中,调节下滴速度,控制样液以每秒1滴的流速通过免疫亲和柱,直至空气进入亲和柱中;
淋洗:用5 mL磷酸盐缓冲液、5 mL水先后淋洗免疫亲和柱,流速为每秒1滴~2滴,直至空气进入亲和柱中,弃去全部流出液,抽干亲和柱;
洗脱:准确加入2 mL甲醇洗脱亲和柱,控制每秒1滴的下滴速度,收集全部洗脱液于离心管中,在50 ℃下氮气吹至近干,加入1.0 mL初始流动相,涡旋30 S溶解残留物,过0.45 μm尼龙针式滤器,供检测用。

四 / 液相色谱-紫外检测器条件

Column:ChromCore C18 5μm, 4.6×150mm;

Mobile Phase:20/80 v/v甲醇/水

Flow rate:1.0 mL/min

Temperature:35 °C

Injection:50 μL

Detection:UV 218 nm

实验谱图

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图 1 呕吐毒素标准品、玉米面粉样品、玉米面粉样品加标对比图

加标回收率

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五 / 实验结论

由图1可以看出,玉米面粉经提取、净化后,使用ChromCore C18色谱柱分析时,基线平稳、目标物无杂质干扰,由加标回收率结果可知SelectCore DON免疫亲和柱加标回收率为96.34%,完全满足测定要求。

相关产品信息    

色谱柱货号

产品描述

货号

ChromCore C18 5μm, 4.6×150mm

A001-050018-04615S

SelectCore DON 免疫亲和柱

呕吐毒素 3mL, 25/pkg

DON100-031500-2

保护柱及柱芯

产品描述

货号

ChromCore C18 5μm, 4.6x10mm
A001-050018-04601S

保护柱卡套(分体式)

Guard-04601S-C1


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