对照品溶液的制备

1.1 混合对照品配制

精密量取禁用农药混合1mL，置20mL量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，备用；

1 .2 气相色谱-串联质谱法分析用内标溶液的制备

取磷酸三苯酯对照品适量，精密称定，加乙腈溶解并制成每1mL含1.0mg的溶液，即得。精密量取适量，加乙腈制成每1mL含0.1μg的溶液。

1.3 空白基质溶液的制备

取丹参空白基质样品，同供试品溶液的制备方法处理制成空白基质溶液。

1.4 基质混合对照溶液的制备

分别精密量取空白基质溶液1.0mL(6份），置氮吹仪上，40°C 水浴浓缩至约0.6mL，分别加入混合对照品溶液10μL、20 μL、50 μL、100μL、150μL、200μL，加乙腈稀释至1mL，涡旋混匀，即得。

供试品溶液的制备

2.1 提取

取供试品粉末(过三号筛)3g，精密称定，置50mL聚苯乙烯具塞离心管中，加入1%冰醋酸溶液15mL，涡旋使药粉充分浸润，放置30分钟，精密加入乙腈15mL，涡旋使混匀，置振荡器上剧烈振荡(500次/分)5分钟，加入SelectCore QuEChERS 萃取盐包 6g MgSO4, 1.5g NaOAc（QS-002），立即摇散，再置振荡器上剧烈振荡(500次/分)3分钟，于冰浴中冷却10分钟，离心(4000转/min)5分钟，待净化。

净化

• SPE净化管：SelectCore QuEChERS 净化管 15mL, Pesticide Residue A07(丹参中药农残Q法)

• 净化：取上述提取液上清液9mL置上述净化管中涡旋使充分混匀，置振荡器上剧烈振荡(500次/分)5分钟使净化完全，离心(4000转/min)5分钟，即得。

• GC/MS/MS测定：精密吸取上清液5mL，置氮吹仪上于35°C 水浴浓缩至约0.4mL，加入混合对照品液再加乙腈稀释至1.0mL，涡旋混匀，再加入0.3 mL磷酸三苯酯溶液，混匀，过0.22μm尼龙针式过滤器，上机分析。

• LC/MS/MS测定：精密吸取上清液5mL，置氮吹仪上于35℃水浴浓缩至约0.4mL，加入混合对照品液再加乙腈稀释至1.0mL，涡旋混匀，再加入0.3 mL水，混匀，过0.22μm尼龙针式过滤器，上机分析。

注意事项：由于GCMSMS分析时间较长，为保证丹参分析数据的准确性，GCMSMS分析建议先提取前加标样品，上机分析后，再处理丹参样品和空白基质溶液，待前加标样品液分析完成后即刻分析丹参样品液，待丹参样品液全部分析完成后再配制基质加标的6个浓度点设置批处理，LCMSMS可直接设置批处理分析。

气相色谱-串联质谱法

（岛津 GC-MS -TQ8040 NX）

• 色谱柱：SHIMADZU SH-Rxi-17Sil MS，30m×0.25mm, 0.25μm;

• 进样口温度：250℃；

• 升温程序：初始温度为60℃，保持1min；以10℃/min升温至160℃；再以2℃/min升温至230℃，最后以15℃/min升温至300℃，保持6min；

• 载气：高纯氦气（纯度>99.999%）；

• 进样方式：不分流进样；

• 恒压模式：146kPa；

• 进样量：1μL。

• 电离方式：电子轰击电离源（EI）；

• 电离能量：70Ev；

• 接口温度：250℃；

• 离子源温度：250℃；

• 监测方式：多反应检测模式（MRM）；

• 溶剂延迟：10.0min。

• 杀虫脒参考LCMSMS分析数据更好；

• 甲基对硫磷

  定量离子：263.10>109.00 CE：13 

  参考离子：125.00>47.00 CE：10

• β -硫丹

  定量离子：206.80>171.80 CE：15 

  参考离子：194.80>159.00 CE：10

• 小建议：做完丹参后建议290℃老化色谱柱2h，或截取掉色谱柱进样口端30cm色谱柱后再进行其他样品的分析。

高效液相色谱-串联质谱法

（岛津 LC-MS 8045）

• 色谱柱：ChromCore C18-MS Pesticides中药农残专用柱(2.1 ×100 mm，2.6μm)

• 流动相：

  A：0.1%甲酸水溶液（含有5mmol/L甲酸铵）

  B：乙腈-0.1%甲酸水溶液（含有5mmol/L甲酸铵）=95:5

• 梯度：

• 流速: 0.3mL/min
  

• 柱温: 40℃

• 进样量: 2µL

• 离子源: 电喷雾离子源（Electrospray ionization，ESI）正离子扫描

• 监测方式：多反应监测（Multiple Reaction Monitoring，MRM）

• 离子源接口电压：4.5kV

• 雾化气：氮气3.0L/min

• 加热气：干燥空气10.0L/min

• DL温度：250℃

• 加热模块温度：400℃

• 接口温度：300℃

• 干燥气：N₂ 10L/min

• 久效磷参考GCMSMS分析数据更好；

• 水胺硫磷

  定量离子：291.00>231.00 CE：-15

  参考离子：291.00>121.00 CE：-30

• 甲拌磷砜

  定量离子：293.00>114.90 CE：-25 

  参考离子：293.00>171.15 CE：-11

• 小建议：做完丹参样品分析后，建议清洗离子源后再进行其他样品的分析。

目标物对比图

添加回收率

稳定性对比

实验讨论