何首乌为蓼科植物何首乌的干燥块根，含有大量蒽醌类成分。这些成分对GC/MS/MS色谱柱污染较为严重，易造成目标物线性不好、回收率低和重现性差，常规的固相萃取法一、固相萃取法二、固相萃取法三都不能很好的净化。

纳谱分析根据植物色素成分特点，优化了固相三对于色素的吸附能力。相比常规固相萃取三，优化后的固相萃取三的SPE柱可以吸附更多色素类成分，从而降低了样品中色素对色谱柱的污染和基质效应。

今天，我们来看看何首乌项目的前处理效果吧。

对照品溶液的制备

1.1 混合对照品配制

精密量取禁用农药混合1mL，置20mL量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀，备用；

1 .2 气相色谱-串联质谱法分析用内标溶液的制备

取磷酸三苯酯对照品适量，精密称定，加乙腈溶解并制成每1mL含1.0mg的溶液，即得。精密量取适量，加乙腈制成每1mL含0.1μg的溶液。

1.3 空白基质溶液的制备

取空白基质何首乌样品，同供试品溶液的制备方法处理制成空白基质溶液。

1.4 基质混合对照溶液的制备

分别精密量取空白基质溶液1.0mL(6份），置氮吹仪上，40°C 水浴浓缩至约0.6mL，分别加入混合对照品溶液10μL、20 μL、50 μL、100μL、150μL、200μL，加乙腈稀释至1mL，涡旋混匀，即得。

供试品溶液的制备

2.1 提取

精密称取5g样品（3号筛），加氯化钠1g，加入50mL乙腈，匀浆处理2分钟，离心后分取上清液，残渣再加50mL乙腈，匀浆处理1分钟，离心后，合并两次提取上清液，减压浓缩至3~5mL，加乙腈定容至10mL，摇匀，待净化。

净化

• SPE柱：SelectCore GCB/NH₂-A 固相萃取柱 500mg/500mg/6mL

• 净化：取SelectCore GCB/NH₂-A 固相萃取小柱用乙腈：甲苯（3：1）10mL活化，量取上述何首乌提取液2mL，置已活化的SelectCore GCB/NH₂-A 固相萃取小柱中，用乙腈：甲苯（3：1）15mL洗脱，收集全部样品液与洗脱液，减压回收至2mL，即得。

• GC/MS/MS测定：精密量取上述减压回收后的样品溶液1mL，氮吹至0.4mL加入混合对照溶液，乙腈定容至1mL，再加入0.3 mL磷酸三苯酯溶液，混匀，过0.22μm尼龙针式过滤器，上机分析。

• SPE柱：SelectCore HLB固相萃取柱200mg/6mL

• 净化：量取上述何首乌提取液3mL，过SelectCore HLB固相萃取柱，收集全部净化液，混匀，即得。

• LC/MS/MS测定：精密量取过固相萃取柱后溶液1mL氮吹至0.4mL加入混合对照品液，乙腈定容至1mL，再加入0.3 mL水，混匀，过0.22μm尼龙针式过滤器，上机分析。

处理后溶液的颜色比对

气相色谱-串联质谱法

（岛津 GC-MS -TQ8040 NX）

• 色谱柱：SHIMADZU SH-Rxi-17Sil MS，30m×0.25mm, 0.25μm;

• 进样口温度：250℃；

• 升温程序：初始温度为60℃，保持1min；以10℃/min升温至160℃；再以2℃/min升温至230℃，最后以15℃/min升温至300℃，保持6min；

• 载气：高纯氦气（纯度>99.999%）；

• 进样方式：不分流进样；

• 恒压模式：146kPa；

• 进样量：1μL。

• 电离方式：电子轰击电离源（EI）；

• 电离能量：70Ev；

• 接口温度：250℃；

• 离子源温度：250℃；

• 监测方式：多反应检测模式（MRM）；

• 溶剂延迟：10.0min。

• 久效磷参考LC/MS/MS测定结果。

高效液相色谱-串联质谱法

（岛津 LC-MS 8045）

• 色谱柱：ChromCore C18-MS Pesticides中药农残专用柱(2.1 ×100 mm，2.6μm)

• 流动相：

  A：0.1%甲酸水溶液（含有5mmol/L甲酸铵）

  B：乙腈-0.1%甲酸水溶液（含有5mmol/L甲酸铵）=95:5

• 梯度：

• 流速: 0.3mL/min
  

• 柱温: 40℃

• 进样量: 2µL

• 离子源: 电喷雾离子源（Electrospray ionization，ESI）正离子扫描

• 监测方式：多反应监测（Multiple Reaction Monitoring，MRM）

• 离子源接口电压：4.5kV

• 雾化气：氮气3.0L/min

• 加热气：干燥空气10.0L/min

• DL温度：250℃

• 加热模块温度：400℃

• 接口温度：300℃

• 干燥气：N₂ 10L/min

添加回收率

实验讨论